La Manera Fácil De Eliminar La Inmunoprecipitación De Cromatina

Es posible que encuentre un código de error relacionado con la solución de problemas de inmunoprecipitación de cromatina. Bueno, hay varias formas de corregir este problema, por lo que hablaremos de ellas en breve.

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    Contenido.Alto entorno de anticuerpos de control no específicos.Débil o completamente sin señal.Baja resolución con grandes áreas que involucran un fondo alto.Problemas de amplificación por PCR.Baja recuperación de ADN.lisis celular.tijeras de cromatina.

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    SOLUCIÓN DE PROBLEMAS

    La Guía de solución de problemas de observación tiene como objetivo proporcionar posibles factores y soluciones a problemas identificables descubiertos al usar la inmunoprecipitación de cromatina (ChIP).

    Red

    Demasiada/poca costura conceptual

  • Insuficiente puede ayudar potencialmente a obstaculizar la disociación de los complejos proteína-ADN en el siguiente camino y conducir: una salida fallida.
  • Un entrecruzamiento excesivo puede enmascarar la nariz y la boca inserciones de epítopos importantes para la captura de anticuerpos, evitar la escisión completa y la cromatina impedir la escisión exitosa del complejo a lo largo de los pasos posteriores.
  • Si está utilizando paraformaldehído, asegúrese de que esté preparado recientemente.
  • Tijera cromática

    Espuma

  • No utilice tubos de microcentrífuga de 1,7 mililitros para volúmenes de muestra superiores a 400 µl.
  • sugerencia

  • Sostenga el ultrasonicador muy cerca de, diría, la parte inferior de la sonda potencial del destilador.
  • Falta de cromatina

  • Recorte significativamente más réplicas, aumente la potencia del ultrasonido, reduzca el número de mallas, posiblemente use significativamente menos células.
  • Cromatina desplazada

  • Realice replicaciones de menor cizallamiento, reduzca la potencia de ultrasonidos, genere más o menos células.
  • Descomposición de la cromatina

  • De hecho, las muestras deben estar en algún lugar entre los pasos de sonicación. Si la sonicación es demasiado larga y demasiado fuerte, es posible que también se requiera una desnaturalización no deseada.
  • Inmunoprecipitación de cromatina

    Bolas magnéticas

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